同位素內(nèi)標(biāo)(Isotope-labeled Internal Standard, ILIS)通過引入與目標(biāo)分析物化學(xué)結(jié)構(gòu)高度相似但含有穩(wěn)定同位素標(biāo)記(如²H、¹³C、¹?N、¹?O等)的內(nèi)標(biāo)物，校正分析過程中的誤差，提升定量準(zhǔn)確性。
其核心原理在于，通過改造核酸或蛋白質(zhì)，將同位素標(biāo)記的探針引入系統(tǒng)。這些探針能夠與生物體內(nèi)的目標(biāo)分子結(jié)合，利用雙向結(jié)合的策略，通過專門的分析技術(shù)，解析出宿主與同位素的相互作用，揭示出生物體的內(nèi)在機(jī)制和環(huán)境響應(yīng)的秘密。
同位素內(nèi)標(biāo)法的步驟清晰而有序：先引入標(biāo)記有抗體或抗原的同位素探針；接著，經(jīng)過反應(yīng)與聚集，形成活性化合物；后儀器準(zhǔn)確檢測(cè)這些反應(yīng)的強(qiáng)度或細(xì)胞表型變化，繪制出反映生物體動(dòng)態(tài)變化的曲線圖，為研究提供深度洞見。
同位素內(nèi)標(biāo)在生物醫(yī)學(xué)、環(huán)境分析、食品安全、臨床診斷等領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用，通過校正基質(zhì)效應(yīng)和前處理?yè)p失，明顯提高定量分析的準(zhǔn)確性和可靠性。未來，隨著同位素標(biāo)記技術(shù)和質(zhì)譜分析方法的發(fā)展，同位素內(nèi)標(biāo)將在更多領(lǐng)域發(fā)揮關(guān)鍵作用。
注意事項(xiàng)
內(nèi)標(biāo)物的驗(yàn)證：需通過色譜保留時(shí)間、質(zhì)譜碎片離子等信息確認(rèn)內(nèi)標(biāo)物與目標(biāo)分析物的分離效果。
同位素豐度的校正：高豐度的同位素標(biāo)記可提高定量準(zhǔn)確性。
內(nèi)標(biāo)濃度的優(yōu)化：內(nèi)標(biāo)濃度應(yīng)與目標(biāo)分析物的預(yù)期濃度范圍相匹配，避免過高或過低導(dǎo)致定量誤差。
